近年來，隨著檢測樣品量的增大、檢測任務(wù)的加重，各個實驗室為了滿足縮短分析時間、降低成本等要求都在建立或采用一些快速的、高通量的檢測方法。例如，在農(nóng)殘上越來越受歡迎的QuEChers方法等。眾所周知，在QuEChERS提取過程中，蔬菜水果中大量色素或動物源性樣品中的脂肪和磷脂會隨著目標(biāo)化合物一起被提取出來。這些共提物可能會干擾色譜分析，污染色譜柱和離子源。簡單有效的前處理顯得尤為重要。本研究采用Oasis PRiME HLB替代常規(guī)填料GCB做果蔬類樣品的凈化，不但能除去色素、磷脂等干擾雜質(zhì)且對平面結(jié)構(gòu)的農(nóng)藥保持較高的回收率，還能將繁瑣的QuEChers凈化步驟變得更加簡潔、快速。
應(yīng)用優(yōu)勢
· Oasis PRiME HLB能有效去除色素的同時又對平面結(jié)構(gòu)的農(nóng)藥沒有保留，很好的彌補(bǔ)了由于GCB對此類農(nóng)藥保留過強(qiáng)從而造成回收率偏低的缺陷
· Oasis PRiME HLB能有效去除動物源性食品中的脂肪、磷脂等干擾雜質(zhì)
· 不同類型的Oasis PRiME HLB凈化產(chǎn)品，使得樣品前處理更加靈活、簡便
· 快速、靈敏的UPLC-MS/MS分析有利于建立高效、省時的多種類/多殘留分析方法
UPLC條件
LC 系統(tǒng): ACQUITY UPLC I-Class(FTN)色譜柱: ACQUITY UPLC HSS T3,1.8 μm, 2.1 mm x 100 mm(部件號：186003539)
流動相:
A: 10mM 乙酸銨+ 0.05%甲酸水溶液
B: 10mM 乙酸銨+0.05%甲酸的甲醇
實驗步驟
QUECHERS提取：
植物源性食品：稱取10 g均質(zhì)的蔬菜水果樣品至50 mL離心管中，并加入測試目標(biāo)化合物。加入10 mL乙腈，用手振搖樣品1 min。然后加入QuEChERS提取鹽包(部件號186006813)，用手大力振搖離心管1 min。在3200 rcf下離心5 min，上清液待Oasis PRiME HLB凈化。
動物源性樣品：稱取2 g均質(zhì)的動物源性樣品至50 mL離心管中，并加入測試目標(biāo)化合物。加入10 mL水和10 mL乙腈混勻，用手振搖樣品1 min。然后加入QuEChERS提取鹽包(部件號186006813)，并大力振搖離心管1 min。在3200 rcf下離心5 min，上清液待Oasis PRiME HLB凈化。
SPE凈化：
將Oasis PRiME HLB小柱安裝到預(yù)先清潔過的真空萃取裝置上或連接一次性注射器配合使用。無需執(zhí)行小柱活化步驟。取部分(不同規(guī)格小柱上樣體積見表1)上述上清液使其通過Oasis PRiME HLB并收集全部濾液。從濾液中吸取100 μL于樣品瓶中，然后加400 μL水稀釋后用于UPLC-MS/MS分析(或者從收集的濾液中定量量取部分經(jīng)氮吹后用流動相定容，然后上機(jī)分析)。
本實驗比較了五種樣品經(jīng)Oasis PRiME HLB小柱的凈化效果，見圖1。從圖上肉眼可見Oasis PRiME HLB可以有效去除樣品提取物中大部分的葉綠素和葉黃素等干擾色素。Oasis PRiME HLB小柱與QuEChERS凈化效果的比較可參見應(yīng)用文章“使用Oasis PRiME HLB小柱快速有效地去除QuEChERS菠菜提取物中的葉綠素”。
本實驗比較了QuEChERS凈化方式和Oasis PRiME HLB對農(nóng)藥回收率的影響。QuEChers凈化管的GCB主要用于樣品中色素的去除，尤其是GCMS分析時尤為關(guān)注。每毫升QuEChERS提取液使用含50 mg GCB填料時才能干凈的去除其中的色素，然而會影響大量平面結(jié)構(gòu)農(nóng)藥的回收率。而Oasis PRiME HLB在達(dá)到同樣的凈化效果時對這些農(nóng)藥的回收率影響很小。圖2比較了Oasis PRiME HLB和50 mg GCB/mL對農(nóng)藥回收率的影響。
本方法對三種植物源性樣品(韭菜、油菜、葡萄)和兩種動物源性樣品(雞肉、雞蛋）進(jìn)行添加回收實驗。實驗中做了三個不同的添加濃度，每個添加濃度做三個平行，平均回收率及RSD結(jié)果見附表。韭菜、油菜和葡萄樣品在10 ng/g(中間濃度)的添加濃度下，回收率在49.2% - 122.1%之間，RSD<30%。雞肉和雞蛋樣品在20 ng/g(中間濃度)的添加濃度下，回收率在58.3% - 134.4%之間，RSD<23%。
本應(yīng)用定量方法為外標(biāo)法，使用空白樣品基質(zhì)配置標(biāo)準(zhǔn)曲線，在0.2 μg/L - 10 μg/L范圍之間具有良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)R2 > 0.99。
·Oasis PRiME HLB不僅可以去除樣品基質(zhì)中的干擾雜質(zhì)，如植物源性食品中的葉綠素和葉黃素等色素，動物源性食品中的脂肪、磷脂等，又能保證待測物尤其是平面結(jié)構(gòu)農(nóng)藥較高的回收率，實現(xiàn)了準(zhǔn)確、快速測定植物源性和動物源性樣品中多農(nóng)藥殘留。
· 本研究中，植物源性食品韭菜、油菜和葡萄在10 ng/g的添加濃度下90%以上的農(nóng)藥回收率在60 - 120%之間；動物源性食品雞蛋和雞肉在在20 ng/g的添加濃度下平均85%的農(nóng)藥回收率在70 - 110%之間。
· 相較于傳統(tǒng)的SPE或QuEChers對農(nóng)殘的凈化Oasis PRiME HLB更加方便、簡潔，容易實現(xiàn)高通量。
